Tatyana Tihomirova (tanchik) wrote,
Tatyana Tihomirova
tanchik

Categories:

GFP и фиксация.

(лопаясь от гордости): а вчера я на работе решила сложную техническую проблему. Всего-то экспериментов за пять в течение пары месяцев. Суть объяснять толку нет, так что проиллюстрирую словами, а для тех кто понимает цитометрию, и картинками под катом. Короче, то что в PNASе, Nature Immunology и остальных подобных журналах авторы смогли покрасить лишь через одно место и изобразить в лишь в виде жалкого подобия левой руки, я таки потрахалась, но покрасила прилично.
(голосом Боярского): Хех, щщенки!
***
И машинку вчера из ремонта отдали (а я так и не рассказала, что же с ней было). Так что я сегодня необычно, аж втройне добра. В виде жеста доброй воли и любви к человечеству могу осчастливить ее микроскопическую часть и поделиться секретом из сабжа (его я тоже решила, но случайно, параллельно с вот этим основным достижением). Короче, если у вас при попытке фиксации клеток пропадает в них GFP/YFP и вы давно уже решили, что это у всех так и иначе просто быть не может, то пишите в комменте что именно у вас GFP, почему вы хотите фиксировать клетки (для какой цели), на что еще вы их красите в этом эксперименте и вопрос "Таня, что же мне делать?". А я напишу вам личкой свой личный работающий протокол, сохраняющий таки GFP сигнал при фиксации, да, по-настоящему сохраняющий. Уникальное по своей щедрости предложение работает, ну скажем, месяц. ;)) Если вы понятия не имеете, что это все значит, но у вас есть френд-биолог/иммунолог/мол биолог и тп, пошлите ссыль ему, что ли. Может, оценит. Верю, что оценит, я ж только вчера пришла с воркшопа по цитометрии, где человек 50, услышав от лектора, что - увы, проблему GFP и фиксации так и не решили до сих пор, хором разочарованно вздохнули. Пришла, доделала свой эксперимент и - вуаля. Я-то решила. ;)
Поясняющие картинки. Вот это - (А, В) - жалкая попытка покрасить на CXCR5 (с одновременной фиксацией) в PNAS


А вот это -(А, С, F) - еще более жалкий результат окраски на CXCR5 с фиксацией в Nature Immunology


А у меня сигнал по CXCR5 сделан такой качественный, как на CD4 и СD8. Потому что я крута. Неимоверно просто. :))
Tags: США, лытдыбр, полезности, работа
Subscribe
  • Post a new comment

    Error

    default userpic

    Your reply will be screened

    Your IP address will be recorded 

    When you submit the form an invisible reCAPTCHA check will be performed.
    You must follow the Privacy Policy and Google Terms of use.
  • 50 comments